| 长双歧杆菌蔗糖磷酸化酶的异源表达及其酶学性质 |
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| 引用本文： | 项蓉,杨金山,娄婷婷,吴子健,张宏宇,赵彦巧,王丹芸,张得光,马兴.长双歧杆菌蔗糖磷酸化酶的异源表达及其酶学性质[J].食品研究与开发,2024,45(5):196-204. |
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| 作者姓名： | 项蓉 杨金山 娄婷婷 吴子健 张宏宇 赵彦巧 王丹芸 张得光 马兴 |
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| 作者单位： | 1.天津商业大学 生物技术与食品科学学院 天津市食品生物技术重点实验室，天津 300134；2.天津科技大学 生物工程学院，天津 300457；3.天津海关动植物与食品检测中心，天津 300461 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划课题（2022YFF1100801）；2022 年天津市研究生科研创新项目（服务产业专项）（2022SKYZ081）；天津市科技计划项目（20YFZCSN00630）；天津市大学生创新创业训练计划项目（202310069097） |
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| 摘 要： | 为挖掘来源于长双歧杆菌的蔗糖磷酸化酶（Bifidobacterium longum sucrose phosphorylase,BloSPase）合成2-O-α-D-吡喃葡糖基-L-抗坏血酸（2-O-α-D-glucopyranosyl-L-ascorbic acid,AA-2G）的潜力，该研究将BloSPase基因在大肠杆菌中异源表达，以BloSPase的水解酶活力为指标，通过单因素试验和响应面法对其表达条件进行优化；并通过镍柱纯化后对其转糖基化活力进行研究。结果表明，BloSPase的最佳表达条件为诱导时间10 h、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG）浓度0.47 mmol/L、诱导温度23℃。在该条件下，水解酶活力可达到（730.35±0.58）U/mL，比酶活达到（95.22±2.45）U/mg。酶学性质研究显示，BloSPase转糖基化活力的最适反应温度为50℃，最适反应pH值为5.2，在40、50℃时表现出较强的热稳定性。其动力学参数Km值为（266.80±23.76）mmol/L,Vmax值为（0.235 0...
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| 关 键 词： | 蔗糖磷酸化酶 大肠杆菌 异源表达 转糖基化活力 酶学性质 |
| 收稿时间： | 2023/12/19 0:00:00 |
Heterologous Expression and Enzymatic Properties of Sucrose Phosphorylase from Bifidobacterium longum |
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| XIANG Rong,YANG Jinshan,LOU Tingting,WU Zijian,ZHANG Hongyu,ZHAO Yanqiao,WANG Danyun,ZHANG Deguang,MA Xing.Heterologous Expression and Enzymatic Properties of Sucrose Phosphorylase from Bifidobacterium longum[J].Food Research and Developent,2024,45(5):196-204. |
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| Authors: | XIANG Rong YANG Jinshan LOU Tingting WU Zijian ZHANG Hongyu ZHAO Yanqiao WANG Danyun ZHANG Deguang MA Xing |
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