微生物法测定婴幼儿乳粉中V_(B12)的优化研究

为解决传统微生物法测定婴幼儿乳粉中V_(B12)的含量试验过程操作繁琐、易受外部因素影响、方法重复性和准确度差等问题,该研究在GB 5413.14—2010的基础上,将菌株储备液分装于菌株保存管中,—70 ℃冻存备用,并确定该批次菌株试验中适宜菌浓度和培养时间。结合95 ℃水浴直接提取样品的优化方法进行准确度和重复性试验。结果表明,该批次菌株70%浓度、50 μL接种量、培养20 h以上的试验方式,在V_(B12)含量0.01～0.1 ng范围内,标准曲线线性关系优于国标方法,R~2值可达到0.99以上;优化方法和国标方法所测结果都与标准样品的标示值相符,且相对于国标方法结果更准确,RSD为3.1%;重复性试验的RSD分别为3.1%、2.6%、3.2%、4.8%和3.2%。该方法操作简便、结果准确、重复性好,能克服传统微生物法的缺陷与不足,为V_(B12)检测方法的改进提供参考。