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荧光定量环介导等温扩增法快速检测食品中沙门氏菌
引用本文:章小洪,张维波,姜 川,范 蕾,陈 梦,汪 昕,卢光英. 荧光定量环介导等温扩增法快速检测食品中沙门氏菌[J]. 食品安全质量检测学报, 2021, 12(20): 8056-8061
作者姓名:章小洪  张维波  姜 川  范 蕾  陈 梦  汪 昕  卢光英
作者单位:丽水市质量检验检测研究院,德清县食品药品检验检测中心;浙江工业大学生物工程学院
基金项目:浙江省市场监督管理局科研计划项目(20190360、20210177)
摘    要:目目的 建立一种快速简易检测食源性沙门氏菌的实时荧光定量环介导等温扩增(quantitative loop-mediated isothermal amplification, qLAMP)方法。方法 依据沙门菌属invA基因序列设计引物, 并结合短时间增菌构建沙门氏菌快速检测qLAMP法, 使用人工污染样品进行验证。结果 建立的qLAMP法最佳反应时间为40 min, 最佳反应温度是65 ℃, 最佳Mg2+浓度为6 mmol/L, Bst 2.0 WarmStart聚合酶的浓度为0.40 U/μL, 反应特异性良好, 纯培养实验表明方法检出限为100 CFU/mL。将沙门氏菌人工添加至鸡胸肉、果蔬沙拉、山泉水中, 经过7 h BPW有效增菌后所建立的qLAMP法在食品基质中的检出限达到5 CFU/25 g。结论 该方法准确、简单易行, 实验成本低, 可用于食品中沙门氏菌的快速检测。通过WarmStart Colorimetric LAMP试剂盒无需昂贵仪器即可快速检测,为沙门氏菌现场即时检测的场景提供技术支持。

关 键 词:invA基因   荧光定量环介导等温扩增   沙门氏菌   即时检测
收稿时间:2021-07-17
修稿时间:2021-10-29

Rapid detection of Salmonella in food by fluorescent quantitative loop-mediated isothermal amplification
ZHANG Xiao-Hong,ZHANG Wei-Bo,JIANG Chuan,FAN Lei,CHEN Meng,WANG Xin,LU Guang-Ying. Rapid detection of Salmonella in food by fluorescent quantitative loop-mediated isothermal amplification[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2021, 12(20): 8056-8061
Authors:ZHANG Xiao-Hong  ZHANG Wei-Bo  JIANG Chuan  FAN Lei  CHEN Meng  WANG Xin  LU Guang-Ying
Affiliation:Lishui Institute for Quality Inspection and Testing,DeQing?Food and Drug Inspection and Testing Center ;College of Biotechnology and Bioengineering, Zhejiang University of Technology
Abstract:
Keywords:invA gene   Fluorescence quantitative loop-mediated isothermal amplification   Salmonella   Point-of-Care detection
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