| 产油核桃内生细菌乙酰辅酶A羧化酶acb基因克隆及优化表达北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 许思远,张永贵,赵沛,曹娟娟,张琴. 产油核桃内生细菌乙酰辅酶A羧化酶acb基因克隆及优化表达北大核心CSCD[J]. 中国油脂, 2023, 48(4): 99-104 |
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| 作者姓名： | 许思远 张永贵 赵沛 曹娟娟 张琴 |
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| 作者单位： | 安徽工程大学 生物与食品工程学院，安徽 芜湖 241000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(21666034)；安徽工程大学中青年拔尖人才计划(S022019014)。 |
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| 摘 要： | 为了探究细菌异质性乙酰辅酶A羧化酶β亚基生物活性及其对乙酰辅酶A羧化酶酶活影响,以高产油核桃内生细菌B.subtilis HB1310基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增其乙酰辅酶A羧化酶羧基转移酶β亚基(β-CT)基因(acb基因),构建pET-28a-acb载体并在E.coli BL21中表达,进一步对乙酰辅酶A羧化酶acb基因的诱导表达条件进行了优化。结果表明:乙酰辅酶A羧化酶acb基因在E.coli BL21中实现了表达,分子质量在25~35 kDa之间;重组蛋白最佳诱导表达条件为诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度1.0 mmol/L、诱导时间6 h、诱导初始pH 8.0,在此条件下工程菌的乙酰辅酶A羧化酶活性可达(4.11±0.03) U/mL,较野生菌提高39.7%。综上,乙酰辅酶A羧化酶β-CT为具有较好生物活性的乙酰辅酶A羧化酶亚基。
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| 关 键 词： | 核桃内生细菌 产油 乙酰辅酶A羧化酶 克隆 优化表达 |
Cloning and expression optimization of acetyl-CoA carboxylase acb gene from oil-producing walnut endophyte |
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| XU Siyuan,ZHANG Yonggui,ZHAO Pei,CAO Juanjuan,ZHANG Qin. Cloning and expression optimization of acetyl-CoA carboxylase acb gene from oil-producing walnut endophyte[J]. China Oils and Fats, 2023, 48(4): 99-104 |
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| Authors: | XU Siyuan ZHANG Yonggui ZHAO Pei CAO Juanjuan ZHANG Qin |
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| Affiliation: | College of Biological and Food Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, Anhui, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | walnut endophyte oil-producing acetyl-CoA carboxylase cloning expression optimization |
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