烟草ζ-胡萝卜素脱氢酶基因的克隆和功能分析 |
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引用本文: | 史艳梅,魏攀,陈媛媛,杨冉,金立锋,刘萍萍,李锋,屈凌波,林福呈,王燃.烟草ζ-胡萝卜素脱氢酶基因的克隆和功能分析[J].烟草科技,2015,48(9):1-8. |
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作者姓名: | 史艳梅 魏攀 陈媛媛 杨冉 金立锋 刘萍萍 李锋 屈凌波 林福呈 王燃 |
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作者单位: | 1.1. 郑州大学化学与分子工程学院, 郑州高新技术产业开发区科学大道100号 450001;2.2. 中国烟草总公司郑州烟草研究院, 郑州高新技术产业开发区枫杨街2号 450001;3.3. 中原工学院理学院, 河南省新郑市龙湖镇淮河路1号 451191;4.4. 河南工业大学化学化工学院, 郑州高新技术产业开发区莲花街100号 450001 |
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基金项目: | 中国烟草总公司郑州烟草研究院科技项目"烟草类胡萝卜素含量的遗传调控和材料验证"(092013CZ0620) |
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摘 要: | 为揭示烟草ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)基因的功能,采用同源克隆的方法从普通烟草(Nicotiana tabacum)中克隆了NtZDS基因,并进行了遗传进化分析。同时通过荧光定量PCR技术分析NtZDS的时空表达模式、利用烟草脆裂病毒诱导的基因沉默(VIGS)体系抑制本氏烟草中ZDS基因的表达,在该基因沉默后再通过定量PCR技术分析NtZDS上下游基因的表达量变化,并检测了烟株色素含量的变化。结果显示:NtZDS基因在普通烟草中至少存在两个同源拷贝,其编码序列与番茄、马铃薯的ZDS基因相似度高于90%。NtZDS在烟草盛花期的叶和花中表达量最高。与对照比较,该基因沉默后,烟株新生叶片出现严重白化现象,能够为VIGS体系提供一个良好的候选报告基因;同时类胡萝卜素合成通路其他基因的表达量和烟株类胡萝卜素、叶绿素含量都显著降低,表明ZDS基因在烟草生长发育及类胡萝卜素合成过程中发挥着重要作用。
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关 键 词: | 烟草 ζ-胡萝卜素脱氢酶 基因 克隆 表达模式 病毒诱导的基因沉默 |
收稿时间: | 2014-08-25 |
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