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重组大肠杆菌生产TaqDNA聚合酶发酵工艺优化
引用本文:肖 云,陈 洁.重组大肠杆菌生产TaqDNA聚合酶发酵工艺优化[J].粮油食品科技,2023,31(4):154-161.
作者姓名:肖 云  陈 洁
作者单位:武汉职业技术学院 生物工程学院,湖北 武汉 430072
摘    要:Taq DNA聚合酶是PCR技术中广泛应用的耐热酶。为提高重组大肠杆菌生产Taq DNA聚合酶的产量,以Taq DNA聚合酶产量和酶的比活力为考察指标,通过单因素实验优化产生Taq DNA聚合酶含量的单因素:发酵温度、pH值、IPTG诱导剂用量、诱导时间、接种量,结果表明:发酵温度、pH值、IPTG诱导剂浓度,对该基因工程菌发酵产Taq DNA聚合酶的比酶活力有显著影响,而诱导培养时间、接种量对产Taq DNA聚合酶的比酶活力影响不显著。故选择发酵温度、pH值、IPTG诱导剂浓度作为响应面的三个因素优化重组大肠杆菌生产Taq DNA聚合酶发酵工艺,响应面分析结果显示对酶的比活力显著性顺序为:IPTG诱导剂浓度>发酵温度>pH值,最佳发酵工艺参数为:发酵温度37.2℃,pH值为7.5,IPTG诱导剂浓度为0.800 mmol/L,在此条件下发酵,Taq DNA聚合酶比活力达到(43.822±0.878)kU/mg。

关 键 词:重组大肠杆菌  Taq  DNA聚合酶  酶比活力  发酵工艺  响应面分析法

Optimization of Fermentation Process for Taq DNA Polymerase Production by Recombinant Escherichia coli
XIAO Yun,CHEN Jie.Optimization of Fermentation Process for Taq DNA Polymerase Production by Recombinant Escherichia coli[J].Science and Technology of Cereals,Oils and Foods,2023,31(4):154-161.
Authors:XIAO Yun  CHEN Jie
Abstract:
Keywords:recombinant Escherichia coli  Taq DNA polymerase  specific activity of enzyme  fermentation process  response surface methodology
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