| 摘 要： | 人类表皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2,HER-2)是乳腺癌最重要的致病基因。本文探讨~(131)I标记的HER-2特异结合小分子模拟肽B2-S22-AFA对乳腺癌细胞的特异性杀伤作用。采用溴代琥珀酰亚胺法(N-Bromide Succinimide,NBS)进行~(131)I标记B2-S22-AFA,测定标记率、放化纯度、稳定性及免疫活性。用Western Blot法和免疫组化法测定人乳腺癌SKBR3及MDA-MB-231Her-2细胞HER-2表达,观察不同浓度表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)条件下B2-S22-AFA对细胞生长的抑制率。设B2-S22-AFA组(B2-S22-AFA终浓度1μg·mL~(–1))、~(131)I-B2-S22-AFA组(~(131)I-B2-S22-AFA终浓度144 kBq·μg~(–1)·mL)、~(131)I组(~(131)I终浓度144 kBq·mL~(–1))、阴性对照组及试剂空白组,每组EGF终浓度均5.0 pg·mL~(–1),采用四唑盐比色法(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)测定SKBR3和MDA-MB-231细胞增殖活性,观察~(131)I-B2-S22-AFA、B2-S22-AFA及~(131)I作用不同时间对两种细胞生长的抑制率。结果显示,HER-2在SKBR3细胞呈强阳性表达,在MDA-MB-231细胞呈弱(或低)表达。~(131)I-B2-S22-AFA标记率、放化纯度及比活度分别为64.8%–79.6%、95.0%–97.6%、151.7 MBq·mg~(–1),在37°C血清中放置4 h、12 h、24 h、48 h、72 h的放化纯度分别95.4%、93.5%、91.4%、88.2%、77.4%,~(131)I-B2-S22-AFA与SKBR3细胞及MDA-MB-231细胞的最大结合率分别(66.47±3.24)%和(3.89±0.81)%(3次)。当EGF存在时,B2-S22-AFA可明显抑制SKBR3细胞生长;无EGF时,B2-S22-AFA无此作用。~(131)I-B2-S22-AFA对SKBR3细胞的杀伤作用较B2-S22-AFA和~(131)I明显增强(均p0.05),B2-S22-AFA对SKBR3细胞杀伤作用显著高于~(131)I(p0.05),~(131)I-B2-S22-AFA和B2-S22-AFA对MDA-MB-231细胞均无杀伤作用。综上所述,~(131)I-B2-S22-AFA可显著加强、加速B2-S22-AFA对HER-2高表达乳腺癌细胞的特异性杀伤作用。
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