小干扰RNA逆转三氧化二砷耐药的白血病K562/AS2细胞Topo Ⅱ基因表达的实验研究 |
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作者姓名: | 张旭艳 卓家才 杜新 李明 陶小梅 史敦云 楼瑾 张琼丽 |
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作者单位: | 深圳市血液病研究所,深圳市第二人民医院血液科,518035 |
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摘 要: | 目的 研究小干扰RNA片段(shRNA)对三氧化二砷(ATO)耐药的白血病细胞株K562/AS2细胞的Topo Ⅱα、TopoⅡβ基因表达及其功能的影响.方法 设计并合成针对Topo Ⅱα和TopoⅡβ基因序列的shRNA各3对,在脂质体的介导下转染K562/AS2细胞;用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)分析Topo Ⅱα、TopoⅡβmRNA的表达水平;流式细胞术检测Topo Ⅱα、TopoⅡβ蛋白表达.结果 针对Topo Ⅱα-shRNA、TopoⅡβ的shRNA作用于K562/AS2细胞24 h后,Topo ⅡαmRNA水平和蛋白水平最大下调为(78.22±0.01)%、(31.17±1.27)%(P<0.05),TopoⅡβmRNA水平和蛋白水平最大下调为(57.36 ±0.01)%、(23.98 ± 1.22)%(P<0.05).结论 转染24 h后针对TopoⅡ的shRNA可抑制对ATO耐药的白血病细胞株K562/AS2细胞TopoⅡ基因的表达.
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关 键 词: | RNA,小分子干扰 DNA拓扑异构酶类,Ⅱ型 砷酸盐类 K562/AS2细胞 |
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