新型蛋白聚糖类生物絮凝剂REA—11的合成途径

谷氨酸棒杆菌CCTCC M201005能合成一种以半乳糖醛酸为主要结构单元的蛋白聚糖类生物絮凝剂(命名为REA—11)。为了研究该聚合物的生物合成途径，首先构建了谷氨酸棒杆菌生物合成REA—11的假设途径，然后从(1)中间代谢产物的添加及相关途径关键酶活性的检测和(2)胞内中间代谢产物的检测两个方面来验证该代谢途径的合理性。研究表明，在培养基中添加代谢途径的中间产物UDP—葡萄糖，可显著提高REA—11的絮凝活性，并且UDP—半乳糖差向酶和UDP—半乳糖脱氢酶的比酶活也分别提高了200％和50％；以不同底物为碳源，UDP—葡萄糖焦磷酸化酶、UDP—半乳糖差向酶和UDP—半乳糖脱氢酶的比酶活与REA—11产量的相关系数可分别达到0．75，0．89，0．97。此外，利用HPLC检测出REA—11合成途径中3种关键中间产物UDP—葡萄糖、UDP—半乳糖和UDP—葡萄糖醛酸。由此证明，所构建的REA—11生物合成途径基本合理。