不同β-葡萄糖苷酶性能分析及对罗汉果苷的转化 |
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作者姓名: | 李登科 王欣驰 陈雪佳 李家霖 胡小妍 路福平 李玉 |
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作者单位: | 天津科技大学 生物工程学院/工业发酵微生物教育部重点实验室,天津,300457;天津科技大学 生物工程学院/工业发酵微生物教育部重点实验室,天津,300457;天津科技大学 生物工程学院/工业发酵微生物教育部重点实验室,天津,300457;天津科技大学 生物工程学院/工业发酵微生物教育部重点实验室,天津,300457;天津科技大学 生物工程学院/工业发酵微生物教育部重点实验室,天津,300457;天津科技大学 生物工程学院/工业发酵微生物教育部重点实验室,天津,300457;天津科技大学 生物工程学院/工业发酵微生物教育部重点实验室,天津,300457 |
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摘 要: | 以Pichia pastorisGS115为宿主,对来源于特异腐质霉Humicolainsolens、棘孢曲霉Aspergillus aculeatus和黑曲霉Aspergillus niger的β-葡萄糖苷酶基因bglHi、bglAa和bglAn进行异源表达。以对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物,分析了3种酶的酶学性质,其中BglAn的酶活力最高,为90.83U/mg。3种酶的最适反应温度和最适pH值范围分别为55~65℃和5.0~6.0。在pH值为6.0、温度50℃、酶量2U的条件下,利用3种酶水解不同浓度的罗汉果苷Ⅴ。结果表明:不同来源的酶水解底物的特异性差别较大,其中BglHi和BglAa水解罗汉果苷Ⅴ生成罗汉果苷ⅢE的转化率较低,仅为5%~7%;而BglAn在底物质量浓度1mg/mL,反应20min时转化率为96.5%;提高底物质量浓度到5mg/mL,反应1h时转化率也可达97.9%,基本实现完全转化。通过酶法转化罗汉果苷Ⅴ,获得了较高纯度的产物罗汉果苷ⅢE,为后期开发不同结构、不同功能罗汉果苷类甜剂提供了新的途径。
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关 键 词: | β-葡萄糖苷酶 克隆表达 酶学性质 酶法转化 罗汉果苷 |
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