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碱性蛋白酶交联聚集体的制备及其催化性能研究
作者姓名:区晓阳  曾英杰  彭飞  倪子富  熊隽  宗敏华  娄文勇
作者单位:华南理工大学 食品科学与工程学院,广东 广州,510640;华南理工大学 食品科学与工程学院,广东 广州 510640;华南协同创新研究院 生物活性分子开发与应用创新中心,广东 东莞 221116
基金项目:国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家重点研发计划;国家重点研发计划
摘    要:碱性蛋白酶在食品、医药、酿造、丝绸、皮革等行业中发挥着重要作用。制备了碱性蛋白酶交联体,并对其催化性能进行研究。在最佳制备条件下(90%叔丁醇作为沉淀剂,沉淀时间为15min,交联剂浓度为33mmol/L,交联时间为6h),交联酶的酶活回收率为22.6%。与游离酶相比,交联酶的最适pH值向碱性方向变化,由7.5变为8.0,最适温度由60℃变成65℃。酶动力学研究表明,交联酶对酪蛋白的催化水解能力(4.3min-1)比游离酶(3.7min-1)更高。尽管交联酶最大反应速度Vmax(9.8mg/(mL·min))低于游离酶(13.3mg/(mL·min)),但交联酶对底物的亲和力Km(2.3mg/mL)比游离酶(3.6mg/mL)有所增加,而且其热稳定性和酸碱稳定性都得到一定程度的提高。另外,在磷酸盐缓冲液中重复使用5和8批次后,交联酶还能保持82.5%和56.5%的酶活性。

关 键 词:碱性蛋白酶  无载体固定化  交联酶聚集体  酶学性质  重复使用稳定性

Preparation and Characteristics of Cross-Linked Enzyme Aggregates of Alkaline Protease
Authors:OU Xiaoyang  ZENG Yingjie  PENG Fei  NI Zifu  XIONG Jun  ZONG Minhua  LOU Wenyong
Affiliation:(School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China;Innovation Center of Bioactive Molecule Development and Application, South China Institute of CollaborativeInnovation, Dongguan 221116, China)
Abstract:OU Xiaoyang;ZENG Yingjie;PENG Fei;NI Zifu;XIONG Jun;ZONG Minhua;LOU Wenyong(School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China;Innovation Center of Bioactive Molecule Development and Application, South China Institute of CollaborativeInnovation, Dongguan 221116, China)
Keywords:alkaline protease  carrier-free immobilization  cross-linked enzyme aggregates  enzymatic characteristics  reuse stability
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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