| 甘油激酶的表达纯化及在酮糖合成中的应用 |
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| 引用本文： | 吴晓茹,李子杰,中西秀树,高晓冬.甘油激酶的表达纯化及在酮糖合成中的应用[J].食品与生物技术学报,2018,37(8):817-6. |
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| 作者姓名： | 吴晓茹 李子杰 中西秀树 高晓冬 |
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| 作者单位： | 江南大学生物工程学院 |
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| 摘 要： | 研究了大肠杆菌MG1655来源的甘油激酶(GK)的表达及其在酮糖合成中的应用。本研究从大肠杆菌MG1655扩增了甘油激酶的基因片段glpK,连接到表达载体pET-28a上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达,利用Ni~(2+)亲和层析柱纯化目的蛋白。利用该甘油激酶可以催化成本较低的底物甘油生成L-3-磷酸甘油,再经过磷酸甘油氧化酶(GPO)的催化生成磷酸二羟基丙酮(DHAP),生成的DHAP可以在不同的DHAP依赖性醛缩酶的催化下与受体D-甘油醛合成酮糖-1-磷酸,最终用酸性磷酸酶脱掉磷酸生成一系列酮糖。结果表明,该酶成功地用于"一釜多酶法"合成体系中,以便宜的底物甘油为前体,合成出包括稀有糖在内的一系列酮糖,生成的产物、产率及比例用TLC、HPLC进行检测。该方法的建立将为其他稀有糖及其衍生物的合成提供理论依据。
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| 关 键 词： | 甘油激酶 醛缩酶 磷酸二羟基丙酮 一釜多酶法 酮糖 |
Expression and Purification of Glycerol Kinase and Its Application for Ketose Synthesis |
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| WU Xiaoru,LI Zijie,NAKANISHI Hideki,GAO Xiaodong.Expression and Purification of Glycerol Kinase and Its Application for Ketose Synthesis[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2018,37(8):817-6. |
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| Authors: | WU Xiaoru LI Zijie NAKANISHI Hideki GAO Xiaodong |
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