| 重组嗜热乳糖酶在毕赤酵母中的表达、纯化与活性分析 |
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| 引用本文： | 李洪波,罗海燕,张树琴,吴东海.重组嗜热乳糖酶在毕赤酵母中的表达、纯化与活性分析[J].食品与生物技术学报,2018,37(8):812-816. |
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| 作者姓名： | 李洪波 罗海燕 张树琴 吴东海 |
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| 作者单位： | 怀化学院生命科学系民族药用植物资源研究与利用湖南重点实验室;中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
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| 摘 要： | 为获得耐高温的重组乳糖酶,PCR扩增激烈热球菌(Pyrococcus furious)乳糖酶基因、构建毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA/Lac并转化毕赤酵母X-33菌株。重组酵母转化子经甲醇诱导,重组嗜热乳糖酶实现了分泌表达并经蛋白印迹验证。纯化前上清液中乳糖酶总活力高达125 U/mL,经镍亲合纯化得重组酶,SDS-PAGE显示其纯度在95%以上,比活力1 800 U/mg,该酶最适温度在105℃左右且热稳定性好,具有很强的水解乳糖能力。
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| 关 键 词： | 嗜热乳糖酶 激烈热球菌 毕赤酵母 分泌表达 纯化 |
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