| MTSase和MTHase在Brevibacillus brevis中的克隆表达及应用研究 |
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| 引用本文： | 吴世雄,宿玲恰,姚锴琳,吴敬,吴丹.MTSase和MTHase在Brevibacillus brevis中的克隆表达及应用研究[J].食品与生物技术学报,2018,37(8):838-844. |
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| 作者姓名： | 吴世雄 宿玲恰 姚锴琳 吴敬 吴丹 |
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| 作者单位： | 食品科学与技术国家重点实验室江南大学;江南大学工业生物技术教育部重点实验室 |
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| 摘 要： | 为实现将来源于嗜酸热硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius)ATCC 33909的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)在短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)中的重组表达,分别以重组质粒pET-24a(+)-treY和pET-24a(+)-treZ为模板PCR扩增得到MTSase和MTHase基因片段,通过与表达载体pSVN连接得到重组质粒,电转化表达宿主Brevibacillus brevis,成功构建重组菌Brevibacillus brevis/pSVN-treY和Brevibacillus brevis/p SVN-treZ。重组菌在TM培养基中发酵48 h,胞内酶活力分别达到MTSase 630.0 U/g(wet cell)、MTHase 170.0 U/g(wet cell)。对重组MTSase和MTHase进行酶转化实验,结果表明,当以质量浓度为100 g/L马铃薯淀粉为底物,酶转化温度为60℃,pH为5.5,加酶量为MTSase 80 U/g淀粉、MTHase 20 U/g淀粉,普鲁兰酶5 U/g淀粉和环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)15 U/g淀粉,反应48 h,海藻糖转化率达到80.2%。
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| 关 键 词： | 麦芽寡糖基海藻糖合成酶 麦芽寡糖基海藻糖水解酶 短短芽孢杆菌 酶活力 海藻糖 |
Heterologous Expression of MTSase and MTHase in Brevibacillus brevis and Its Application |
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| WU Shixiong,SU Lingqi,YAO Kailin,WU Jing,WU Dan.Heterologous Expression of MTSase and MTHase in Brevibacillus brevis and Its Application[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2018,37(8):838-844. |
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| Authors: | WU Shixiong SU Lingqi YAO Kailin WU Jing WU Dan |
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