| 莱茵衣藻IFT25的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 王震,董彬,樊振川,孟德梅.莱茵衣藻IFT25的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备[J].食品与生物技术学报,2018,37(9):903-908. |
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| 作者姓名： | 王震 董彬 樊振川 孟德梅 |
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| 作者单位： | 天津科技大学教育部食品营养与安全重点实验室;天津市食品营养与安全和药物化学联合实验室;天津科技大学新农村发展研究院 |
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| 摘 要： | IFT25是维持纤毛运动和感知所必须元件纤毛内运输蛋白IFT复合物B中的重要组分之一,探索IFT25尤其在模式生物莱茵衣藻中的作用机制具有重要作用。作者采用经济和简单的方法,制备莱茵衣藻IFT25的兔源多克隆抗体。将ift25分别连接到pMAL-c2X-和pET-28a(+)-载体上,转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导大量表达,并经亲和纯化后蛋白质纯度超过90%。通过颈背部皮下多次免疫8周龄大的新西兰大白兔,制备多克隆抗体,取第五次免疫后血清用ELISA测定效价超过128 000。抗血清依次经过Protein A和硝酸纤维素膜纯化后,用Western blotting检测抗体特异性,结果表明制备的抗体可以特异性识别莱茵衣藻中的IFT25,为IFT25作用机制的阐明和纤毛相关疾病的诊断提供了重要理论和方法支持。
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| 关 键 词： | 莱茵衣藻 纤毛 IFT25 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 |
Prokaryotic Expression and Purification of Chlamydomonas reinhardtii IFT25 in Escherichia coli and Preparation of Polyclonal Antibody |
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| WANG Zhen,DONG Bin,FAN Zhenchuan and MENG Demei.Prokaryotic Expression and Purification of Chlamydomonas reinhardtii IFT25 in Escherichia coli and Preparation of Polyclonal Antibody[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2018,37(9):903-908. |
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| Authors: | WANG Zhen DONG Bin FAN Zhenchuan and MENG Demei |
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