| 绿色木霉内切葡聚糖酶基因Ⅰ的克隆表达 |
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| 引用本文： | 黄晓梅,杨谦,范金霞,陈秀玲,王允,张向东.绿色木霉内切葡聚糖酶基因Ⅰ的克隆表达[J].哈尔滨工业大学学报,2010,42(12):1921-1926. |
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| 作者姓名： | 黄晓梅 杨谦 范金霞 陈秀玲 王允 张向东 |
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| 作者单位： | 哈尔滨工业大学生命科学系;哈尔滨工业大学生命科学系;哈尔滨工业大学生命科学系;东北农业大学园艺学院;哈尔滨工业大学生命科学系;哈尔滨工业大学生命科学系 |
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| 基金项目： | 十一五国家科技支撑项目(2006BAD07A00);国家高技术研究发展计划资助项目(2006AA10Z424) |
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| 摘 要： | 为深入研究绿色木霉(Trichoderma viride)内切葡聚糖酶(EGⅠ)的特性与功能,利用Northern blot方法分析不同碳源条件下绿色木霉的egⅠ表达,采用RT-PCR方法从绿色木霉T4中克隆egⅠ基因的cD-NA序列,测序与生物信息学分析,并构建诱导型表达载体pYES2-egⅠ,转化酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)INVSc1和H158中表达.结果表明:绿色木霉在含有纤维素的液体培养基中生长,egⅠ高效表达,在秸秆中表达量最高.纤维二糖中表达量相对较低,在葡萄糖、果糖中没有表达.egⅠ基因编码框长度1 377bp,编码459个氨基酸.含有信号肽,为分泌蛋白,属于糖苷水解酶家族7,具有纤维素酶结合域(CBD)和催化域(CD).INVSc1转化子发酵培养48 h达到转录高峰期,60 h达到酶活高峰期,酶活为0.081 6 U/mL,酶活比H158转化子提高32.5%.
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| 关 键 词： | 绿色木霉 葡聚糖内切酶Ⅰ 酿酒酵母 表达 |
Cloning and heterogorous expression of EGI gene from Trichoderma viride |
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| HUANG Xiao-mei,YANG Qian,FAN Jin-xi,CHEN Xiu-ling,WANG Yun and ZHANG Xiang-dong.Cloning and heterogorous expression of EGI gene from Trichoderma viride[J].Journal of Harbin Institute of Technology,2010,42(12):1921-1926. |
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| Authors: | HUANG Xiao-mei YANG Qian FAN Jin-xi CHEN Xiu-ling WANG Yun and ZHANG Xiang-dong |
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| Affiliation: | Dept.of Life Science and Engineering,Harbin Institute of Technology,Harbin 150001,China;Dept.of Life Science and Engineering,Harbin Institute of Technology,Harbin 150001,China;Dept.of Life Science and Engineering,Harbin Institute of Technology,Harbin 150001,China;College of Horticulture,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China;Dept.of Life Science and Engineering,Harbin Institute of Technology,Harbin 150001,China;Dept.of Life Science and Engineering,Harbin Institute of Technology,Harbin 150001,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trichoderma viride endo-β-glucanaseⅠ Saccharomyces cerevisiae expression |
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