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果聚糖蔗糖酶基因的克隆表达及酶学性质分析
引用本文:徐君,张言周,黎循航,管政兵,蔡宇杰,廖祥儒.果聚糖蔗糖酶基因的克隆表达及酶学性质分析[J].食品与生物技术学报,2019,38(3):124-129.
作者姓名:徐君  张言周  黎循航  管政兵  蔡宇杰  廖祥儒
作者单位:江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡214122; 江西农业大学 生物科学与工程学院,江西 南昌330045,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡214122
摘    要:将来源于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的果聚糖蔗糖酶(levansucrase)基因进行克隆,并将其在Escherichia coli BL21(DE3)中表达。对发酵产酶后的菌体进行破壁和离心,粗酶液经镍柱纯化后,进行酶学性质研究。结果表明,重组酶的水解酶活和转移酶活最适温度分别为45℃和40℃,最适pH分别为6.5和6.0。此外,果聚糖蔗糖酶的K_m和V_(max)分别为150.74mmol/L和21.23μmol/(mL·min)。最后,在pH 6.0、40℃条件下,果聚糖蔗糖酶催化反应12 h后,体系中果聚糖质量分数可达34.05%。

关 键 词:果聚糖蔗糖酶  解淀粉芽孢杆菌  重组表达  性质
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