代谢工程改造酿酒酵母高效合成β-葡聚糖 |
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引用本文: | 李茜,于文文,吕雪芹,刘延峰,李江华,堵国成,陈敬华,刘龙.代谢工程改造酿酒酵母高效合成β-葡聚糖[J].食品与发酵工业,2022(23):1-7. |
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作者姓名: | 李茜 于文文 吕雪芹 刘延峰 李江华 堵国成 陈敬华 刘龙 |
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作者单位: | 1. 江南大学未来食品中心;2. 糖化学与生物技术教育部重点实验室(江南大学) |
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基金项目: | 国家重点研发计划项目(2018YFA0900300,2018YFA0900504); |
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摘 要: | β-葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的一种多糖,具有抗炎抗氧化等重要的作用。为提高酿酒酵母中β-葡聚糖的产量,该研究采用代谢工程中常用的“推-拉-抑制”策略。首先,通过在酿酒酵母中过表达β-葡聚糖合成途径关键酶及其调节亚基“拉”动关键前体二磷酸尿苷(uridine diphosphate, UDP)-葡萄糖流向β-葡聚糖合成途径;之后通过强化前体UDP-葡萄糖途径酶,将代谢通量“推”向前体UDP-葡萄糖的有效合成;最后抑制蛋白质糖基化等UDP-葡萄糖的其他消耗途径,积累更多的UDP-葡萄糖用于目的产物β-葡聚糖的合成。除此之外,通过引入木糖还原酶基因xyl1,木糖醇脱氢酶基因xyl2和木酮糖激酶基因xyl3,构建了木糖氧化还原途径;进一步通过过表达转运蛋白Hxt7(F79S),敲除snf1基因,提高了对木糖的利用能力,并最终将β-葡聚糖的产量提高至86.09 mg/g。最后,利用半乳糖诱导型启动子Pgal1动态调控内切葡聚糖酶基因(eng1)表达,使酿酒酵母中β-葡聚糖的分子质量从1×106~2×106 g/mol降低至1.2...
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关 键 词: | 酿酒酵母 β-葡聚糖 代谢工程 木糖-葡萄糖共利用 分子质量 |
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