重组酶聚合酶扩增反应结合侧流层析试纸条技术快速鉴别大西洋鳕鱼制品真伪 |
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引用本文: | 王慧芳,喻勇新,李晨虹,陈文隽,凌岚馨,周颖.重组酶聚合酶扩增反应结合侧流层析试纸条技术快速鉴别大西洋鳕鱼制品真伪[J].食品与发酵工业,2022(17):291-297. |
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作者姓名: | 王慧芳 喻勇新 李晨虹 陈文隽 凌岚馨 周颖 |
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作者单位: | 1. 上海海洋大学食品学院;2. 农业农村部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室;3. 上海海洋大学环境DNA技术与水生态健康评估工程中心;4. 上海海洋大学海洋动物系统分类与进化上海高校重点实验室 |
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基金项目: | 上海市科学技术委员会2022年度“创新行动计划”农业领域项目(22N31900700); |
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摘 要: | 建立了重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification, RPA)结合侧流层析试纸条技术(RPA-lateral flow dipstick, RPA-LFD)快速鉴别大西洋鳕鱼制品真伪的方法。对比大西洋鳕鱼和常用来冒充鳕鱼的鱼类线粒体基因组序列,设计针对大西洋鳕鱼的特异性探针和引物,建立针对大西洋鳕鱼的RPA-LFD检测方法。该实验筛选最佳引物和探针并评估其特异性,优化反应温度、时间和现场检测条件,并对20份市售“大西洋鳕鱼”及常见的冒充鳕鱼的鱼类制品进行现场检测,评估检测效果。实验结果表明,RPA-LFD检测方法特异性强,在44℃、14 min条件下的检测效果最好。在现场开展快速检测,效果良好,20份鳕鱼制品检测结果经过基因测序证实和产品真实成分一致。该研究建立的大西洋鳕鱼RPA-LFD检测方法特异性强、反应耗时短、操作简便、结果可视,有良好的现场快速检测应用前景,为大西洋鳕鱼制品现场快速检测提供了新思路,为水产品市场监管提供了技术支持。
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关 键 词: | 大西洋鳕鱼 重组酶聚合酶扩增反应 真伪 侧流层析试纸条技术 现场快速检测 |
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