液相色谱-串联质谱法快速测定野生菌中9种蘑菇毒素

目的 建立液相色谱-串联质谱技术（LC-MS/MS）测定野生菌中5种急性肝衰竭型（α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鬼笔毒肽）和4种神经-精神紊乱型（鹅膏蕈氨酸、毒蝇母、毒蝇碱和裸盖菇素）蘑菇毒素的分析方法。方法 样品经干燥后采用0.5%（V/V）甲酸50%（V/V）甲醇-水溶液提取、乙腈沉淀蛋白质、水稀释后，采用XBridge^TM BEH C₁₈柱（150 mm×3.0 mm， 2.5 μm）分离、0.005%（V/V）甲酸水溶液-甲醇流动相体系梯度洗脱，MS/MS多反应监测（MRM）模式测定。结果 通过优化样品提取、稀释倍数和色谱条件，实现基于纯溶剂标准校正的不同野生菌中9种蘑菇毒素的定性和定量测定。样品基质中9种蘑菇毒素的检出限（LOD）和定量限（LOQ）分别为6~15 mg/kg和20~50 mg/kg，线性范围为0.004~2 mg/L，相关系数r在0.997 3~0.999 5之间。50、500和5 000 mg/kg三水平加标平均回收率为78.6%~109.7%，相对标准偏差（RSD）为2.7%~9.0%。多起中毒事件中采集的不同野生菌毒素组成和含量差异大。结论 本方法操作简便、快速，结果准确，已应用于常见有毒野生菌中蘑菇毒素检测和中毒应急事件处置，可以为中毒病因的鉴定和患者的及时救治提供快速、准确的技术支持。

Fast determination of 9 mushroom toxins in wild fungus by liquid chromatography-tandem mass spectrometry