结核分枝杆菌融合蛋白亚单位疫苗对BCG初始免疫的加强效应及保护效力 |
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引用本文: | 李青,傅林锋,王秉翔,姜雯雯,于红娟,雒彧,张颖,祝秉东. 结核分枝杆菌融合蛋白亚单位疫苗对BCG初始免疫的加强效应及保护效力[J]. 中国生物制品学杂志, 2010, 23(3) |
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作者姓名: | 李青 傅林锋 王秉翔 姜雯雯 于红娟 雒彧 张颖 祝秉东 |
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作者单位: | 李青,雒彧(兰州人学结核病研究中心暨病理生理学研究所,兰州,730000);傅林锋,王秉翔(兰州生物制品研究所,兰州,730046);姜雯雯,于红娟,祝秉东(兰州大学结核病研究中心暨病原生物学研究所,兰州,730000);张颖(兰州大学结核病研究中心暨病原生物学研究所,兰州,730000;美国霍普金斯大学布隆博格公共卫生学院分子微生物学与免疫学系) |
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基金项目: | 国家科技重大专项基金,国家高技术研究发展计划(863计划),新世纪优秀人才支持计划 |
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摘 要: | 目的探讨结核分枝杆菌融合蛋白亚单位疫苗对BCG初始免疫的加强效应及保护效力。方法将Ag85B、Ag85B-Mpt64190-198-HspX(AMH)、Ag85B-Mpt64190-198-Mtb8.4(AMM)以及AMH+AMM蛋白分别与佐剂二甲基三十六烷基铵(DDA)和卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)混合,制备亚单位疫苗。第0周用BCG皮下免疫C57BL/6小鼠,第8、10周分别用各蛋白疫苗皮下加强免疫,以PBS和BCG(仅免疫1次)作为对照。末次免疫后4周,采血检测血清抗体水平,并分离脾淋巴细胞,检测分泌IFNγ的水平;末次免疫后12周,经尾静脉注射H37Rv株,6周后取肺,进行菌落计数,抗酸及HE染色观察。结果各亚单位疫苗加强组诱导产生的特异性抗Ag85BIgG抗体水平均明显高于BCG组;融合蛋白疫苗加强组免疫小鼠脾细胞经Ag85B和PPD刺激后,产生分泌IFNγ的淋巴细胞数明显多于BCG组;融合蛋白加强组免疫小鼠肺组织结核结节面积与BCG组比较,差异无统计学意义;仅AMM+AMH加强组免疫小鼠肺组织菌落计数明显低于BCG组,其抗酸染色阳性细菌数明显低于PBS、BCG及AMH、Ag85B加强组。结论AMH和AMM疫苗联合加强BCG免疫,能诱导小鼠特异性的细胞免疫和体液免疫应答,具有较强的免疫原性,可增强BCG的保护效力。
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关 键 词: | 结核分枝杆菌 融合蛋白 亚单位疫苗 初始-强化免疫策略 |
Protective Efficacy of Mycobacterium tuberculosis Fusion Protein Subunit Vaccine as A Booster to Enhance BCG Primed Immunity |
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Abstract: | Objective To investigate the protective efficacy of Mycobacterium tuberculosis fusion protein subunit vaccine as a booster to enhance BCG primed immunity.Methods Mycobacterium tuberculosis fusion protein subunit vaccines were prepared by mixing dimethyl-dioctyldecyl ammonium bromide(DDA)as an adjuvant and BCG polysaccharide nucleic acid(BCG-PSN)with proteins Ag85B,Ag85B-Mpt64190-198-HspX(AMH),Ag85B-Mpt64190-198-Mtb8.4(AMM)and AMH+AMM respectively.C57BL/6 mice were immunized s.c.with BCG at week 0,and booste... |
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Keywords: | Mycobacterium tuberculosis Fusion protein Subunit vaccine Prime-boost strategy |
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