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乙醛还原酶工程菌的构建以及与葡萄糖脱氢酶工程菌偶联还原制备R-CHBE
引用本文:金永琴,徐娴,毛政,何冰芳.乙醛还原酶工程菌的构建以及与葡萄糖脱氢酶工程菌偶联还原制备R-CHBE[J].化工进展,2010,29(6).
作者姓名:金永琴  徐娴  毛政  何冰芳
作者单位:1. 南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京,210009
2. 浙江省食品药品监督管理局培训中心,浙江杭州,310012
基金项目:国家973计划资助项目 
摘    要:R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(alr),构建重组大肠杆菌E.coliBL21/pET-alr,并与葡萄糖脱氢酶的基因工程菌(BL21/pET-gdh)进行偶联转化COBE。合理调整双菌双酶比例,当BL21/pET-alr和BL21/pET-gdh的湿菌重比为6∶1时,CHBE的产量达到最高,无需添加辅酶,转化22h摩尔转化率达到95.88%,产物R-CHBE的对映体过量值ee为96%,较好地实现了双酶偶联制备R-CHBE。

关 键 词:NADPH再生  葡萄糖脱氢酶  乙醛还原酶  R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

Production of R-CHBE using two recombinants carrying aldehyde reductase coupling GDH gene
JIN Yongqin,XU Xian,MAO Zheng,HE Bingfang.Production of R-CHBE using two recombinants carrying aldehyde reductase coupling GDH gene[J].Chemical Industry and Engineering Progress,2010,29(6).
Authors:JIN Yongqin  XU Xian  MAO Zheng  HE Bingfang
Abstract:
Keywords:
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