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环介导等温扩增与qPCR用于检测肉制品中狗源性成分的比较
引用本文:韦 涛,黄继锦,黄惠琳,黄晓韵,谢耐珍,张 璜.环介导等温扩增与qPCR用于检测肉制品中狗源性成分的比较[J].食品安全质量检测技术,2021,12(8):3060-3070.
作者姓名:韦 涛  黄继锦  黄惠琳  黄晓韵  谢耐珍  张 璜
作者单位:广西-东盟食品检验检测中心;广州双螺旋基因技术有限公司
基金项目:广西重点研发计划项目(桂科AB18126084)
摘    要:目的 建立基于实时荧光PCR和环介导等温扩增检测肉制品中狗源性成分的检测方法并比较2种方法的检测效能。方法 针对狗线粒体CYTB基因保守序列, 采用Primer Explorer Version 4软件设计环介导等温扩增引物, Primer Express 3.0.1软件设计实时荧光PCR引物及探针。提取狗肉基因组DNA作为阳性模板, 黄牛肉等20种基因组DNA作为阴性对照, 分析扩增特异性; 用含靶序列的人工质粒确定检测灵敏度及人工掺肉样确定最低检出限; 用市售肉制品分析检出率。结果 对于肉制品中狗源性成分检测, 实时荧光PCR和环介导等温扩增检测均有较好的特异性, 人工质粒分析灵敏度分别为0.1、1 fg/μL。对10种市售狗肉制品的狗源性成分均检出阳性、10份不含狗肉制品均检出阴性, qPCR法和环介导等温扩增法的检测结果符合率均为100%。结论 qPCR法和环介导等温扩增法在检测肉及肉制品中的狗源性成分时, 在灵敏度、检出限和准确度上具有相当的效能。

关 键 词:狗源性成分    肉类掺假鉴定    环介导等温扩增技术    实时荧光PCR    肉制品
收稿时间:2020/12/23 0:00:00
修稿时间:2021/3/15 0:00:00

Comparison of loop-mediated isothermal amplification and qPCR used for the detection of the dog-derived ingredients in meat products
WEI Tao,HUANG Ji-Jin,HUANG Hui-Lin,HUANG Xiao-Yun,XIE Nai-Zhen,ZHANG Huang.Comparison of loop-mediated isothermal amplification and qPCR used for the detection of the dog-derived ingredients in meat products[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2021,12(8):3060-3070.
Authors:WEI Tao  HUANG Ji-Jin  HUANG Hui-Lin  HUANG Xiao-Yun  XIE Nai-Zhen  ZHANG Huang
Affiliation:Guangxi-ASEAN Food Inspection and Testing Center; Guangzhou Double Helix Gene Technology Co., Ltd
Abstract:
Keywords:dog-derived ingredients  meat adulteration identification  loop-mediated isothermal amplification technology  quantitative real-time PCR  meat products
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