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同步增菌结合实时荧光聚合酶链式反应快速检测食品中5种致病菌
引用本文:姚艳玲,周宇东,刘骆强,管佳丽,谢 琳. 同步增菌结合实时荧光聚合酶链式反应快速检测食品中5种致病菌[J]. 食品安全质量检测学报, 2022, 13(13): 4258-4264
作者姓名:姚艳玲  周宇东  刘骆强  管佳丽  谢 琳
作者单位:嘉兴市食品药品与产品质量检验检测院,嘉兴市食品药品与产品质量检验检测院,嘉兴市食品药品与产品质量检验检测院,嘉兴市食品药品与产品质量检验检测院,嘉兴市食品药品与产品质量检验检测院
基金项目:浙江省市场监督管理局科技项目(20210150)Fund: Supported by Science and Technology Program of Zhejiang Provincial Administration for Market Regulation(20210150)
摘    要:摘 要:目的 实现食品中5种致病菌的同步增菌,并结合实时荧光聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,建立快速检测的方法体系。方法 比较金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门氏菌5种目标菌分别在营养肉汤和缓冲蛋白胨水中的生长曲线;优化DNA模板提取的方法;采用实时荧光PCR技术及熔解曲线分析,建立5种致病菌的快速检测方法。结果 缓冲蛋白胨水可以作为5种目标菌的同步增菌液,增菌3 h后5种目标菌能被检出,最低检出的DNA浓度范围为10-3~10-4 ng/μL。经熔解曲线分析,5种目标菌的特征熔解Tm值范围为79.51~87.39℃。结论 本研究建立的5种致病菌快速检测方法,检测总时间大约为6 h,且方法灵敏度和特异性均能满足检测要求。

关 键 词:同步增菌;食源性致病菌;实时荧光PCR;熔解曲线
收稿时间:2022-04-18
修稿时间:2022-06-23

Rapid detection of 5 kinds of foodborne pathogens by real-time polymerase chain reaction with simultaneous enrichment
YAO Yan-Ling,ZHOU Yu-Dong,LIU Luo-Qiang,GUAN Jia-Li,XIE Lin. Rapid detection of 5 kinds of foodborne pathogens by real-time polymerase chain reaction with simultaneous enrichment[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2022, 13(13): 4258-4264
Authors:YAO Yan-Ling  ZHOU Yu-Dong  LIU Luo-Qiang  GUAN Jia-Li  XIE Lin
Affiliation:Jiaxing Testing Institute for Food,Drug and product quality Control;Zhejiang,China,Jiaxing Testing Institute for Food,Drug and product quality Control;Zhejiang,China,Jiaxing Testing Institute for Food,Drug and product quality Control;Zhejiang,China,Jiaxing Testing Institute for Food,Drug and product quality Control;Zhejiang,China,Jiaxing Testing Institute for Food,Drug and product quality Control;Zhejiang,China
Abstract:
Keywords:Simultaneous enrichment   Foodborne pathogens   Real-time PCR   Melting curve
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