基于FRET影像技术可视化研究活细胞在分化诱导过程中的FAK和Src信号活性(英文) |
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作者姓名: | 徐文峰 卓越 廖晓玲 李波 傅亚 |
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作者单位: | 重庆科技学院;美国伊利诺伊大学香槟分校; |
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基金项目: | National Natural Science Foundation of China (31271014,31170923,81101154);Natural Science Key Foundation Project of CQ in China (CSTC2012JJB0097);Research Foundation of Chongqing University of Science & Technology (CK2010B18,CK2011Z03) |
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摘 要: | 使用基于荧光共振能量转移(FRET)技术的FAK和Src生物传感器(DNA荧光探针),实时监控活细胞在诱导过程中FAK和Src的变化活动。结果显示,在诱导分化试剂加入后,Lyn-、Kras-、cyto-标记的3种不同FAK和Src DNA探针发生瞬时磷酸化,荧光共振能量转移明显和迅速,从活性变化角度证实了FAK和Src影响HMSCs的成骨分化。同时,通过FRET技术可视化研究了HMSCs中桩蛋白paxillin在诱导剂刺激下的活性变化,发现paxillin主要在细胞伪足、边缘发生磷酸化变化,HMSCs形态从纤状向纺球状改变,导致细胞骨架重建,推测是诱导剂促使细胞骨架变化从而引起细胞中FAK和Src活性的变化。
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关 键 词: | FRET FAK生物传感器 Src生物传感器 分化 磷酸化 |
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