聚乙二醇修饰重组人干扰素-α1b条件的优化 |
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作者姓名: | 杨宇峰 黄静 徐帆洪 吴腾捷 吴自荣 楼觉人 |
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作者单位: | [1]上海生物制品研究所第一研究室,上海200052 [2]华东师范大学生命科学学院,上海200052 |
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基金项目: | 国家863计划专题课题(2007AA02Z100);上海市科委重点攻关计划(054319924). |
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摘 要: | 目的对聚乙二醇(PEG)衍生物化学修饰重组人干扰素-α1b(rhIFN-α1b)的条件进行优化。方法以3种不同的第2代PEG衍生物对rhIFN-α1b进行修饰,SDS-PAGE分析PEG及修饰产物的表观相对分子质量。对反应pH值、温度、时间、修饰剂用量等修饰条件进行优化,并对修饰产物进行初步分离纯化和活性检测。结果PEG的电泳表观相对分子质量大于其理论值;PEG20000的修饰率(92.1%)高于PEG5000和PEG10000;修饰剂用量和pH值是主要影响因素,最佳pH为9.0,rhIFN-αlb与PEG20000的最佳摩尔比为1∶10,时间和温度影响甚微。单点修饰产物保留了14.4%的体外活性,多点修饰产物无活性。结论选择了合适的PEG衍生物并优化了修饰条件,为进一步深入研究奠定了基础。
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关 键 词: | 聚乙二醇 重组人干扰素-α1b 化学修饰 优化 |
文章编号: | 1004-5503(2008)04-0329-04 |
修稿时间: | 2007-07-30 |
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