基于适配体识别-荧光法检测肠致病大肠杆菌

基于适配体识别和荧光探针技术,发展了一种检测肠致病大肠杆菌(EPEC)的新型分析方法。该方法以生物素化适配体1为捕获探针,通过生物素与亲和素的特异性结合得以固定在微孔板中;以FAM标记的适配体2作为显示探针,当有目标物存在的情况下,生物素化适配体1将捕获目标物质并与其相结合,同时FAM标记的适配体2也会与目标物质相结合,从而使得目标物标记上荧光信号,通过测定荧光信号可实现对目标物质的定量检测。考察了影响方法分析性能的各种条件,结果发现当微孔板包被亲和素质量浓度为100μg/m L,生物素化适配体1浓度为100 nmol/L,FAM标记的适配体2浓度为150 nmol/L时,可获得方法的最佳分析表现。在最佳试验条件下,方法对肠致病大肠杆菌检测的线性范围为50~106cfu/m L,检出限为50 cfu/m L。方法选择性良好,操作简单,已成功应用于实际样品中肠致病大肠杆菌的检测。