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七烯甲萘醌合成过程中关键蛋白的定位分析
作者姓名:陈奇  张智航  夏洪志  孙怡  金柯  吕雪芹  崔世修  刘龙
作者单位:1. 江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室;2. 江南大学未来食品中心;3. 南通励成生物工程有限公司
基金项目:国家自然科学基金(31871784);;国家重点研发计划(2018YFA0900300);
摘    要:七烯甲萘醌作为维生素K2的重要亚型,在细胞中主要存在于细胞膜上,在氧化磷酸化的过程中起到电子载体的作用。作为七烯甲萘醌合成过程中的关键酶,1,4-二羟基-2-萘甲酸异戊二烯基转移酶(1,4-dihydroxy-2-naphthoic acid prenyltransferase, MenA)和甲基转移酶(methyltransferase, MenH)目前研究较少,其在细胞中的分布还未被研究,这也限制了七烯甲萘醌产量的进一步提高。该研究重点关注MenA和MenH在细胞内的分布问题,首先构建MenA、MenH和eGFP的融合蛋白,利用荧光定位的方法确定MenA和MenH在细胞中的定位。然后,使用表面活性剂Triton-100破坏细胞膜的结构,发现随着表面活性剂浓度的增加,七烯甲萘醌的合成受到明显抑制。该研究表明细胞膜结构的完整性是七烯甲萘醌合成的前提条件,并且揭示了七烯甲萘醌是在细胞膜上直接被合成,不是被转运到细胞膜中。研究结果为深入探索七烯甲萘醌合成机制提供了方向。

关 键 词:七烯甲萘醌  枯草芽孢杆菌  MenA  MenH  细胞膜  定位
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