基因枪法建立紫菜丝状体遗传转化模式 |
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引用本文: | 张喆,姜鹏,杨锐,费修绠,唐学玺,秦松.基因枪法建立紫菜丝状体遗传转化模式[J].高技术通讯,2010,20(2). |
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作者姓名: | 张喆 姜鹏 杨锐 费修绠 唐学玺 秦松 |
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作者单位: | 1. 中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003;中国科学院海洋研究所,青岛,266071 2. 中国科学院海洋研究所,青岛,266071 3. 中国科学院海洋研究所,青岛,266071;宁波大学海洋生物工程浙江省重点实验室,宁波,315211 4. 中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,863计划,浙江省科技计划重点 |
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摘 要: | 以坛紫菜和条斑紫菜的自由丝状体为材料,利用基因枪法分别转化CaMV35S、SV40、FCP、Amt、Ubi 5种启动子与报告基因组合,转化后48h进行原位组织化学染色检测,首次针对重要经济红藻紫菜的自由丝状体建立并优化遗传转化技术,为紫菜研究提供了新工具。结果显示,SV40启动子可以驱动laeZ报告基因(编码β-半乳糖苷酶)在紫菜丝状体中的瞬间表达,空白与阴性对照未检测到本底;其它4种启动子未检测到基因表达。进一步优化实验发现,在可裂膜650psi、轰击距离6cm下获得最高转化效率为8.0×10~(-5),经定量检测与双因子方差分析,是最佳转化参数,提示基因枪参数对外源基因转化效率具显著影响。
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关 键 词: | 紫菜 丝状体 基因枪 lacZ报告基因 SV40启动子 |
Establishment of a concocelis-mediated transformation system for Porphyra by biolistic PDS-1000/He |
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Abstract: | |
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Keywords: | Porphyra concocelis particle delivery system lacZ reporter gene SV40 promoter |
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