| 食品中椰毒假单胞菌酵米亚种实时荧光PCR检测的研究 |
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| 引用本文： | 林 捷,方陈玉,陆晶芳,尹丹韩,赵奇琦,王加胜.食品中椰毒假单胞菌酵米亚种实时荧光PCR检测的研究[J].食品安全质量检测技术,2020,11(11):3538-3544. |
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| 作者姓名： | 林 捷 方陈玉 陆晶芳 尹丹韩 赵奇琦 王加胜 |
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| 作者单位： | 杭州市食品药品检验研究院 |
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| 摘 要： | 目的建立食品中椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法。方法根据椰毒假单胞菌酵米面亚种16S～23S rRNA基因片段序列,用Oligo7设计一对特异性引物和一个TaqMan探针,摸索最佳退火温度,最佳引物和探针浓度,建立椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法。通过对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌以及22种其他标准菌株进行实时荧光PCR检测,验证本法的特异性和抗干扰性。同时从菌液浓度和DNA浓度水平上进行研究,确定该检测方法的灵敏度。结果用该方法检测23种菌,除唐菖蒲伯克霍尔德氏菌外,其他22种细菌均为阴性。抗干扰性试验显示杂菌对检测结果不影响,本法抗干扰能力强。通过灵敏度试验的研究,确定本法检测椰毒假单胞菌酵米面亚种的菌液灵敏度为1×10~2 CFU/mL,DNA灵敏度为250 fg/μL。结论本试验设计的引物和探针具有较强特异性、抗干扰性以及灵敏度,该方法具有很好的研究价值和应用前景。
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| 关 键 词： | 椰毒假单胞菌酵米亚种 实时荧光PCR TaqMan探针 |
| 收稿时间： | 2020/3/5 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/3/31 0:00:00 |
Detection of Pseudomonas cocovenenans subsp. farinofermentans by fluorescence real-time PCR method |
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| LIN Jie,FANG Chen-Yu,LU Jing-Fang,YIN Dan-Han,ZHAO Qi-Qi,WANG Jia-Sheng.Detection of Pseudomonas cocovenenans subsp. farinofermentans by fluorescence real-time PCR method[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2020,11(11):3538-3544. |
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| Authors: | LIN Jie FANG Chen-Yu LU Jing-Fang YIN Dan-Han ZHAO Qi-Qi WANG Jia-Sheng |
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| Affiliation: | Hangzhou Institute for Food and Drug Control |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pseudomonas cocovenenans subsp farinofermentans fluorescence real-time PCR TaqMan probe |
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