人乳铁蛋白基因山羊乳腺特异性表达载体的构建 |
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引用本文: | 牛长红,李菊芳.人乳铁蛋白基因山羊乳腺特异性表达载体的构建[J].中国科技博览,2009(35):282-283. |
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作者姓名: | 牛长红 李菊芳 |
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作者单位: | 中山大学生命科学院,四川仁寿县卫校 |
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摘 要: | 人乳铁蛋白(human lactoferrin,hLf)是一种铁结合性糖蛋白,具有多种重要的生理功能,因其巨大的经济价值和使用价值而引起广泛关注。目前已在小鼠、奶牛、昆虫、烟草等系统中表达了重组的人乳铁蛋白。但生产的hLf远远不能满足市场需求,鉴于乳腺反应器的优越性,所以应用基因工程大量生产乳腺特异性表达的hLf具有重要的实际意义。本研究先将hLf进行分子克隆,然后经限制性内切酶PmeI切割和胶回收获得hLf片断,与此同时,将真核表达载体pBCI用限制性内切酶XhoI消化并进行末端修饰,然后将其与hLf片断进行连接,最后将连接产物转化大肠杆菌并筛选阳性重组子。经PCR鉴定和限制性内切酶分析,结果表明成功构建了含有山羊乳腺细胞特异性表达启动子β-casein promoter的人乳铁蛋白基因真核表达载体pBC I-hLf,这就为hLf在乳腺组织中的特异性表达奠定了基础。。
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关 键 词: | 人乳铁蛋白 分子克隆 乳腺特异性表达 载体构建 |
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