黑曲霉TC-01产柚苷酶分离纯化及其降解内毒素研究初探

[目的]对黑曲霉TC-01产柚苷酶进行分离纯化及酶学性质研究,并对柚苷酶降解内毒素进行初步研究。[方法]黑曲霉TC-01发酵优化后的酶液经硫酸铵分级盐析、透析浓缩、DEAE Bio-Sep FF离子交换层析等分离纯化,考察酶学性质,初步研究柚苷酶对内毒素的降解作用。[结果]柚苷酶纯化后,比活力6429.3u/mg,纯化倍数31.1倍。酶学性质研究结果表明TC-01产柚苷酶最适pH4,最适温度60℃,考察金属离子对酶活影响,1~10mM Ca~(2+)、Mg~(2+)对柚苷酶酶活有促进作用,Zn~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)对柚苷酶的酶活有抑制作用,Fe~(2+)抑制作用最为强烈。柚苷酶对内毒素具有降解作用,柚苷酶与内毒素反应1h,内毒素降解率达到79.9%。[结论]研究为柚苷酶的工业化生产提供理论依据,同时拓宽了柚苷酶的应用范围,为进一步研究柚苷酶降解内毒素提供了基础数据,具有重要的科学意义和应用价值。

Study on purification of Naringinase from Aspergillus niger TC-01 and it's degradation of endotoxin