| 芽孢杆菌弹性蛋白酶基因的克隆、表达及其大豆肽的制备能力鉴定 |
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| 引用本文： | 宋笛,刘艳芝. 芽孢杆菌弹性蛋白酶基因的克隆、表达及其大豆肽的制备能力鉴定[J]. 食品工业科技, 2015, 0(2): 235-237,252 |
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| 作者姓名： | 宋笛 刘艳芝 |
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| 作者单位： | 长春职业技术学院;吉林省农科院农业生物技术研究所 |
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| 基金项目： | 吉林省科技发展计划项目(20125097) |
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| 摘 要： | 从芽孢杆菌中克隆得到弹性蛋白酶并命名为TX1,并连入p EAZY E1载体,构建了原核表达载体p EAZY E1-TX1。重组质粒导入大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导基因表达。表达产物经Ni柱纯化后通过p H-stat测定其制备大豆肽的水解能力。序列分析结果表明TX1基因长度为1143bp,与Genbank上已报道序列(JQ305692.1)同源性最高为99.48%,产生的碱基突变不影响其氨基酸编码。蛋白表达分析结果表明,当IPTG浓度为0.3mmol·L-1,诱导4h蛋白表达量最高。经SDS-PAGE和Western分析结果表明,经Ni离子亲和层析纯化获得量大小为39.4ku的弹性蛋白酶His-TX1。初步确定其在50℃、p H为7.4反应4h时的大豆肽水解率最高,达到14.51%。
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| 关 键 词： | 芽孢杆菌 弹性蛋白酶 克隆 大豆肽 |
Cloning and expression of the elastase gene Bacillus subtilis and identification of the ability of preparation of soybean peptide |
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| SONG Di;LIU Yan-zhi. Cloning and expression of the elastase gene Bacillus subtilis and identification of the ability of preparation of soybean peptide[J]. Science and Technology of Food Industry, 2015, 0(2): 235-237,252 |
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| Authors: | SONG Di LIU Yan-zhi |
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| Affiliation: | SONG Di;LIU Yan-zhi;Changchun Vocational Institute of Technology;Agro-Biotechnology Research Institute,Jilin Academy of Agricultural Sciences; |
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