| 应用毕赤酵母表达中国株HIV-1核心蛋白Gag |
| |
| 引用本文： | 江文正,金宁一,王宏伟,张应玖,金洪涛,王海燕.应用毕赤酵母表达中国株HIV-1核心蛋白Gag[J].粉末涂料与涂装,2002,15(2):72-74. |
| |
| 作者姓名： | 江文正 金宁一 王宏伟 张应玖 金洪涛 王海燕 |
| |
| 作者单位： | 解放军军需大学基因工程重点实验室，解放军军需大学基因工程重点实验室，解放军军需大学基因工程重点实验室，解放军军需大学基因工程重点实验室，吉林大学生命科学学院，黑龙江省青岗县第3人民医院 长春130062，长春130062，长春130062，长春130062，长春130023，16110 |
| |
| 摘 要： | 目的 构建含HIV-1Gag全长基因的重组酵母表达质粒pPICGAG，并在毕赤酵母中进行表达。方法用Not I和XhoI将含HIV－1 Gag全长基因的质粒pKSGAG双酶切后，克隆到酵母表达载体pPIC9中，构建了重组表达质粒 pPICGAG。pPICGAG用 SacI线性化后，电转化毕赤酵母 GS115，PCR鉴定阳性酵母转化子，并分别将PCR阳性的酵母转化子在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达，表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果 酵母转化子的整合率为72．7％。SDS-PAGE结果显示表达蛋白的相对分子质量为55000左右，与预计计算的值相同。Western blot结果显示表达蛋白能与单克隆抗体发生特异性反应。结论 在毕赤酵母中成功地表达了HIV-1核心蛋白Gag，且表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性。
|
| 关 键 词： | HIV-1 核心蛋白 毕赤酵母 表达 |
| 修稿时间： | 2001年5月14日 |
Expression of HIV-1 Gag Protein(Chinese Strain)in Pichia Pastoris |
| |
| JIANG Wenzheng,JIN Ningyi,WANG Hongwei et al.Expression of HIV-1 Gag Protein(Chinese Strain)in Pichia Pastoris[J].Chinese Journal of Biologicals,2002,15(2):72-74. |
| |
| Authors: | JIANG Wenzheng JIN Ningyi WANG Hongwei |
| |
| Abstract: | Abstract] Objective To construct a recombinant plasmid pPICGAG for the expression of whole length of HIV - 1 Gag gene in Pichia pastoris . Methods The plasmid pKSGAG containing the whole length of HIV - 1 Gag gene was digested with Not I and Xhol and cloned into expression vector pPIC9. The constructed plasmid pPICGAG was linarized with Sac I and transformed to Pichia pastoris GS 115.The positive transforma-nts were identified by PCR and expressed in BMGY and BMMY media.The expressed products were analyzed by SDS - PAGE. Results The integration rate of transformant was 72.7% . SDS - PAGE showed a relative molecular weight of expressed protein of about 55000, and Western blot showed specific reaction of it with McAb. Conclusion The HIV - 1 Gag protein with good reactogenicity and specificity was successfully expressed in Pichia pastoris. |
| |
| Keywords: | HIV-1 Core protein Pichia pastoris Expression |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
