| 丙型肝炎病毒JFH1 NS5A基因对HC-J4病毒复制和感染性的影响 |
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| 引用本文： | 王永智,王文博,许刚,曹明媚,任浩,戚中田.丙型肝炎病毒JFH1 NS5A基因对HC-J4病毒复制和感染性的影响[J].粉末涂料与涂装,2011,24(4). |
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| 作者姓名： | 王永智 王文博 许刚 曹明媚 任浩 戚中田 |
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| 作者单位： | 王永智,WANG Yong-zhi(第二军医大学微生物学教研室全军生物侦检与防护重点实验室上海市医学生物防护重点实验室,上海200433;解放军254医院心内科,天津300142);王文博,许刚,曹明媚,任浩,戚中田,WANG Wen-bo,XU Gang,CAO Ming-mei,REN Hao,QI Zhong-tian(第二军医大学微生物学教研室全军生物侦检与防护重点实验室上海市医学生物防护重点实验室,上海,200433) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，军队"十一五"专项课题基金，上海市重点学科建设项目 |
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| 摘 要： | 目的探讨丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)2a FL-J6JFH NS5A基因置换对1b型HC-J4复制和感染性的影响,为建立HCV 1b细胞模型奠定基础。方法将JFH1 NS5A置换至HC-J4基因组内,构建嵌合全长基因组HC-J4/JFHNS-5A。体外制备野生型HC-J4、嵌合体及FL-J6JFH的RNA转录体,脂质体介导转染Huh-7.5细胞,采用间接免疫荧光法(IFA)检测转染细胞内的蛋白表达,HCV负链RNA特异性RT-PCR法和荧光定量PCR方法(FQ-PCR)检测基因复制情况。转染后不同时间收集转染细胞上清,感染naive Huh-7.5细胞,观察其感染性。结果 IFA未观察到野生型HC-J4和嵌合体转染细胞内HCV蛋白的表达,但在转染后18 d内的各个时间点,均检测到HCV负链RNA,表明嵌合体和野生型HC-J4在转染细胞内呈低水平复制。转染后第9天和12天,FQ-PCR检测表明,嵌合体转染细胞内HCV RNA水平明显高于野生型转染的细胞(P<0.05)。不同时间点转染细胞上清感染naive Huh-7.5细胞后,IFA均未观察到表达HCV蛋白的阳性细胞。结论 JFH1 NS5A蛋白虽然在一定程度上可提高1b型HC-J4株在体外培养细胞中的复制能力,但还不足以产生能够检测到的感染性病毒颗粒。HCV 1b细胞模型的建立尚受其他因素的影响。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 2a基因型 1b基因型 病毒复制 感染 |
Effect of Hepatitis C Virus JFH1 NS5A Gene on Replication and Infectivity of HC-J4 Virus |
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| WANG Yong-zhi,WANG Wen-bo,XU Gang,CAO Ming-mei,REN Hao,QI Zhong-tian.Effect of Hepatitis C Virus JFH1 NS5A Gene on Replication and Infectivity of HC-J4 Virus[J].Chinese Journal of Biologicals,2011,24(4). |
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| Authors: | WANG Yong-zhi WANG Wen-bo XU Gang CAO Ming-mei REN Hao QI Zhong-tian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis C virus(HCV) Genotype 2a Genotype 1b Virus replication Infection |
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