酶促恒温扩增技术快速鉴定食品中牡蛎成分

目的：针对牡蛎建立基于酶促恒温扩增(Enzymatic recombinase amplification,ERA)技术的快速检测方法。方法：基于NCBI上牡蛎线粒体的基因保守序列，通过Primer Premier 5.0软件设计5对ERA特异检测引物，并筛选出最佳引物。优化ERA反应的模板浓度、引物浓度、扩增温度和时间，最终获得最佳的反应体系，并进行灵敏度和特异性的验证，同时分别选取市场上几种牡蛎及其相关产品进行样本验证。结果：最终得出最佳ERA反应温度为39℃，最佳反应时间为20 min，优化后反应体系检测出牡蛎相关食品中的牡蛎成分灵敏度可达800 fg/μL，且特异性良好。结论：建立的检测方法具有操作简单、快速、不依赖于高端设备的优势，较高的特异性和灵敏度，为食品中牡蛎成分的快速、恒温、现场鉴定提供了一种新手段。