Fe(Ⅱ)-亚硝基R盐分光光度法测定食品中半胱氨酸

在酸性缓冲溶液中，半胱氨酸的巯基能够将Fe³⁺还原成Fe²⁺,Fe²⁺与亚硝基R盐生成黄绿色的配合物，最大吸收波长为714 nm。随着半胱氨酸的浓度增加，吸光强度差值逐渐增大，基于此原理提出了间接分光光度法测定半胱氨酸的含量。试验优化了最佳反应条件：pH 5.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液用量为2.50 mL,200 mg/L Fe(Ⅲ)溶液用量为1.00 mL,1.00 g/L亚硝基R盐溶液用量为1.00 mL，反应时间为5 min。体系的吸光度差值ΔA与半胱氨酸的浓度C呈线性关系，线性范围为0.50～4.50 mg/L，相关系数r=0.9995，络合物的表观摩尔吸光系数为2.096×10⁴ L/(mol·cm)。所建方法成功用于酱油、护肝保健品、矿泉水中半胱氨酸的含量测定，不同样品中半胱氨酸回收率介于99.09%～101.36%之间，相对标准偏差在0.91%～2.74%之间，结果满意。