酸枣仁蛋白的分离纯化及体外免疫活性

目的:优选酸枣仁蛋白(Ziziphi Spinosae Semen Protein,ZSSP)分离纯化工艺,同时基于有丝分裂原激活蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)和转录因子核因子(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路探讨其免疫调节作用机制。方法:采用凝胶层析和离子交换层析分离纯化酸枣仁蛋白,并采用脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7巨噬细胞模型进行免疫活性筛选,采用ELISA法检测分离纯化组分对RAW 264.7细胞中TNF-α、IL-6、NO分泌的影响,采用Western blot法分别检测JNK、ERK和NF-κB的磷酸化水平。结果:获得了S1F2G1和S1F2G2 2个酸枣仁蛋白分离纯化组分,其中S1F2G1组分对RAW 264.7细胞的增殖率为32%,并能够调节MAPK和NF-κB信号通路中的JNK、ERK和NF-κB的磷酸化水平。结论:S1F2G1组分对RAW 264.7巨噬细胞具有免疫调节的作用,其作用机制可能与刺激MAPK和NF-κB信号通路中的相关蛋白表达有关。