Klebsiella sp.WL1316乙醇脱氢酶基因过表达提高乙醇生产效率

为获得能用于纤维素乙醇高效生产的基因重组菌株，文中针对能利用木质纤维素水解液的Klebsiella sp.WL1316,对其乙醇脱氢酶adh基因进行了克隆和同源过表达。成功构建adh-pET-28a-Klebsiella sp.WL1316重组菌株，通过对菌株发酵稻草水解液生产乙醇过程的监测确定该重组菌适宜的发酵时间为48 h。结果表明：进一步通过单因素和响应面试验获得菌株乙醇发酵生产的优化工艺参数为IPTG诱导浓度0.89 mmol/L,发酵起始pH值7.59,起始还原糖质量浓度60.60 g/L。在此优化工艺条件下进行验证实验，乙醇产量达(8.28±0.55)g/L,与模型的理论预测值较接近，说明建立的模型是切实可行的，并且，该乙醇产量为同等发酵条件下野生菌的2.26倍，说明adh基因的过表达促进了乙醇产量的显著提高。