马铃薯块茎中多酚氧化酶互作蛋白的筛选

多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)是导致马铃薯酶促褐变的关键酶,探究马铃薯酶促褐变过程中与PPO存在互作的蛋白质至关重要。通过采取构建StPOT32原核表达载体,利用His标签纯化树脂进行纯化并获得纯度较高的StPOT32蛋白的方法,以纯化得到的马铃薯StPOT32为抗原制备了抗体,然后通过免疫沉淀-质谱联用技术分析了可能与PPO存在相互作用的蛋白质。质谱结果表明,大量蛋白被StPOT32抗体富集,共富集到2种蛋白酶、60种蛋白酶抑制子、18种氧化应激蛋白、28种防御蛋白作为与PPO互作的候选蛋白。这些候选蛋白中包括已被证明可以影响PPO活性的蛋白,以及与PPO存在相似生理功能的蛋白。该文章初步探究与PPO可能存在互相作用的蛋白,为阐明PPO活性的调节机制提供一定的理论基础。