| 减少重组蛋白TP25在Protein L层析中形成多聚体方法的建立 |
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| 引用本文： | 展波,高星星,曹强庚,彭延杰. 减少重组蛋白TP25在Protein L层析中形成多聚体方法的建立[J]. 中国生物制品学杂志, 2019, 0(7): 794-797,802 |
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| 作者姓名： | 展波 高星星 曹强庚 彭延杰 |
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| 作者单位： | 山东省生物制品研究所研发中心;山东第一医科大学第二附属医院;山东省妇幼保健院国家生育调控技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 山东省重点研发计划(2016GSF201188);山东省医药卫生科技发展计划(2017WS275) |
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| 摘 要： | 目的建立减少重组蛋白TP25在ProteinL层析中形成多聚体的方法。方法通过在ProteinL层析纯化重组蛋白TP25使用的洗脱缓冲液中添加半胱氨酸(L-cysteine,Cys)等保护剂,并采用碱性溶液中和洗脱液的方法优化多聚体去除条件,经非还原SDS-PAGE检测纯化过程中目的蛋白多聚体的变化情况,葡聚糖凝胶SephadexG25层析去除洗脱液中Cys。结果去除ProteinL层析形成多聚体的最适条件为:用含Cys终浓度为100mmol/L的20mmol/L柠檬酸溶液进行直接洗脱,并经0.5mmol/L的NaOH溶液中和。该条件下纯化的目的蛋白纯度可达95%以上,且多聚体含量大幅减少。葡聚糖凝胶SephadexG25可有效去除半胱氨酸。结论在洗脱液中添加Cys可有效减少重组蛋白TP25在ProteinL层析纯化过程中多聚体的形成。
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| 关 键 词： | 重组蛋白 PROTEIN L层析 L-半胱氨酸 多聚体 |
A method for decreasing formation of polymer during Protein L chromatography of recombinant protein TP25 |
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| ZHAN Bo,GAO Xing-xing,CAO Qiang-geng,PENG Yan-jie. A method for decreasing formation of polymer during Protein L chromatography of recombinant protein TP25[J]. Chinese Journal of Bilogicals, 2019, 0(7): 794-797,802 |
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| Authors: | ZHAN Bo GAO Xing-xing CAO Qiang-geng PENG Yan-jie |
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| Affiliation: | (Research and Development Center,Shandong Institute of Biological Products,Tai’an 271000,Shandong Province,China) |
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| Abstract: | ZHAN Bo;GAO Xing-xing;CAO Qiang-geng;PENG Yan-jie(Research and Development Center,Shandong Institute of Biological Products,Tai’an 271000,Shandong Province,China) |
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| Keywords: | Recombinant protein Protein L chromatography L-cysteine(Cys) Polymer |
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