| 铜绿假单胞菌RhlR抗血清制备 |
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| 引用本文： | 訾静,王军,高磊,张琨,张绪,万一.铜绿假单胞菌RhlR抗血清制备[J].粉末涂料与涂装,2019(1):72-75. |
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| 作者姓名： | 訾静 王军 高磊 张琨 张绪 万一 |
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| 作者单位： | 陕西省微生物研究所分子生物学研究中心 |
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| 基金项目： | 陕西省科学院应用基础研究项目(2014K-06) |
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| 摘 要： | 目的在原核系统中表达铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)PAO1的调控蛋白RhlR,制备兔抗RhlR抗血清。方法构建重组表达载体pGEX-4T-1-rhlR和pET-22b-rhlR并转化至大肠埃希菌BL21感受态细胞中,IPTG诱导表达GST-RhlR和His-RhlR蛋白,经GST或Ni2+亲和层析纯化重组蛋白。将His-RhlR蛋白免疫新西兰大白兔,制备RhlR抗血清,GST-RhlR蛋白包被ELISA板,检测效价。结果构建的表达载体pGEX-4T-1-rhlR和pET-22b-rhlR经双酶切及测序鉴定证明构建正确;构建的工程菌表达的目的蛋白His-RhlR和GST-RhlR相对分子质量分别为29 000和54 000,表达量均约占菌体总蛋白的85%,纯度大于90%。制备的RhlR抗血清效价可达1∶80 000。结论获得高效价的RhlR抗血清,为PA中rhl调控系统的研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 铜绿假单胞菌 原核表达 RhlR 抗血清 |
Preparation of antiserum against RhlR in Pseudomonas aeruginosa |
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| ZI Jing,WANG Jun,GAO Lei,ZHANG Kun,ZHANG Xu,WAN Yi.Preparation of antiserum against RhlR in Pseudomonas aeruginosa[J].Chinese Journal of Biologicals,2019(1):72-75. |
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| Authors: | ZI Jing WANG Jun GAO Lei ZHANG Kun ZHANG Xu WAN Yi |
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| Affiliation: | (Research Center of Molecular Biology,Shoanxi Institute of Microbiology,Xi'an 710043,Shoonxi Province,China) |
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| Abstract: | ZI Jing;WANG Jun;GAO Lei;ZHANG Kun;ZHANG Xu;WAN Yi(Research Center of Molecular Biology,Shoanxi Institute of Microbiology,Xi'an 710043,Shoonxi Province,China) |
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| Keywords: | Pseudomonas aeruginosa (PA) Prokaryotic expression RhlR Antiserum |
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