| 肺炎链球菌免疫小鼠程序的优化及杂交瘤细胞株的建立 |
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| 引用本文： | 吴元元,沈荣,李雄雄,应莲芳,周晖国,徐世友,张生琰. 肺炎链球菌免疫小鼠程序的优化及杂交瘤细胞株的建立[J]. 中国生物制品学杂志, 2019, 0(8) |
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| 作者姓名： | 吴元元 沈荣 李雄雄 应莲芳 周晖国 徐世友 张生琰 |
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| 作者单位： | 兰州生物制品研究所有限责任公司 |
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| 摘 要： | 目的优化肺炎链球菌CSR SCS2 clone1小鼠的免疫程序,同时建立肺炎链球菌C多糖(C polysaccharides,CPs)杂交瘤细胞株。方法制备免疫抗原CSR SCS2 clonel,进行小鼠免疫程序优化:抗原量[(0. 5～2)×10~8个、(1～4)×108个、(2. 4～10)×10~8个)]、免疫间隔时间(3 d、1周、2周)、免疫途径(腹腔、腹股沟及尾静脉),同时确定抗原是否添加佐剂,间接ELISA法检测小鼠血清抗体水平。采用优化程序免疫小鼠,取血清效价最高的小鼠脾细胞,经传统单克隆抗体制备技术建立肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞株,并检测细胞株的染色体数目及其分泌抗体的稳定性及特异性。结果确定小鼠最适免疫程序为:抗原量为(1～4)×108个,且需添加弗氏佐剂,免疫间隔时间为1周,免疫途径为腹股沟注射。最适程序免疫小鼠血清抗体效价达1∶12 000以上。建立了3株肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞,命名为A4、G8、H10株,染色体数目分别为98、102和102,分泌的抗体具有良好的稳定性和特异性。结论成功优化了肺炎链球菌小鼠的免疫程序,并建立了肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞株,为肺炎链球菌荚膜多糖中C-Ps含量检测方法的建立奠定了基础。
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| 关 键 词： | 肺炎链球菌 C多糖 免疫程序 杂交瘤细胞 |
Optimization of immune procedure of Streptococcus pneumoniae in mice and establisment of hybridoma cell strains |
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