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马抗中东呼吸综合征冠状病毒特异性F(ab’)_2的制备
引用本文:邱泊宁,胡星星,闫飞虎,王翀,崔健男,盖微微,曹增国,王化磊,赵永坤,杨松涛,夏咸柱.马抗中东呼吸综合征冠状病毒特异性F(ab’)_2的制备[J].粉末涂料与涂装,2019(2).
作者姓名:邱泊宁  胡星星  闫飞虎  王翀  崔健男  盖微微  曹增国  王化磊  赵永坤  杨松涛  夏咸柱
作者单位:吉林大学动物医学学院;军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室;吉林农业大学动物科技学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;东北农业大学动物医学学院;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
摘    要:目的采用免疫亲和层析技术纯化制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)特异性IgG与F(ab’)_2。方法以经MERS-Co V病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)对马匹进行多次免疫所制备的高免血清为原料,原核表达的MERS-CoV刺突蛋白S受体结合域(S-receptor binding domain,S-RBD)为抗原蛋白制备免疫亲和柱,提取制备抗原特异性IgG或F(ab’)_2。间接ELISA法检测各样品的活性,MERS假病毒中和试验检测样品的中和活性,BCA法测定样品的浓度,并计算收率。结果所制备的特异性IgG与特异性F(ab’)2的纯度分别为90. 1%和92. 8%,收率分别为8. 7%和3. 07%;在相同的浓度下,所制备的特异性IgG或F(ab’)_2的活性和中和活性均高于对照组中的血清总Ig G或总F(ab’)_2。结论成功制备了马抗MERS-CoV特异性IgG或F(ab’)_2,为建立更加安全与高效的抗MERS-CoV免疫球蛋白F(ab’)_2制备工艺奠定了基础。

关 键 词:中东呼吸综合征  冠状病毒  病毒样颗粒  免疫亲和层析  免疫球蛋白  F(ab’)_2

Preparation of specific equine F(ab')_2 against Middle East respiratory syndrome coronavirus
Abstract:
Keywords:
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