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| 烤后烟叶基因组DNA提取条件优化 | |
| 作者姓名： | 马林 王广超 罗昭标 寇晓腾 张文龙 |
| 作者单位： | 郑州轻工业学院烟草科学与工程学院;抚州市烟草公司资溪县分公司烟叶管理部 |
| 摘 要： | 为解决烤后烟叶基因组DNA提取稳定性差的问题,以烤后烟叶为材料,对CTAB法提取基因组DNA进一步改良优化:对CTAB沉淀缓冲液使用量、裂解时间、Tris平衡酚的处理次数和RNase处理时间4个影响因素进行单因素优化.实验结果表明:CTAB沉淀缓冲液使用DNA溶液体积的1.5倍、裂解时间40 min、Tris平衡酚抽提1次和RNase(10 mg/mL,1μL)处理10 min,能得到主带清晰的烤后烟叶基因组DNA.该方法提取得到的烤后烟叶基因组DNA OD260/OD280为1.7～1.9,OD260/OD230>2.0,35 ng左右基因组DNA即能得到清晰的RAPD和SCAR图谱,适用于以PCR为基础的分子生物学实验. |
| 关 键 词： | 烤后烟叶 基因组DNA DNA提取 PCR |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |