中温大曲中产淀粉酶芽孢杆菌的筛选鉴定及培养条件优化

为了获得高产淀粉酶的芽孢杆菌（Bacillus sp.），该研究采用稀释平板法和划线法从中温大曲中分离纯化芽孢杆菌，通过透明圈法初筛和3,5二硝基水杨酸（DNS）法复筛，获得高产淀粉酶芽孢杆菌，并采用形态学观察和16S r RNA同源序列分析方法进行菌种鉴定。以淀粉酶活力为响应值，采用单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、Box-Behnken试验对筛选菌株的培养条件进行优化。结果表明，共分离纯化出72株芽孢杆菌，从中筛选得到一株淀粉酶活力最高的芽孢杆菌菌株，编号为ZTW17-6，经鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）；其最佳培养条件为乳糖50 g/L、蛋白胨60 g/L、接种量5%、发酵温度35℃、转速180 r/min、装液量76 m L/250 m L、初始pH值7。在此优化条件下，淀粉酶活力达到8 352.95 U/m L，是优化前的2.61倍。