| RNAi抑制DNA甲基转移酶1的表达对胃癌细胞p16基因的影响 |
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| 引用本文： | 赵 军,朱 磊,赵国海. RNAi抑制DNA甲基转移酶1的表达对胃癌细胞p16基因的影响[J]. 金属学报, 2018, 23(4): 395-399. DOI: 10.12092/j.issn.1009-2501.2018.04.006 |
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| 作者姓名： | 赵 军 朱 磊 赵国海 |
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| 作者单位： | 皖南医学院弋矶山医院胃肠外科，芜湖 241000，安徽 |
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| 基金项目： | 安徽省科技攻关计划项目（1604a0802098）；芜湖市科技局科技惠民计划项目（2014hm26） |
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| 摘 要： | 目的:运用RNAi（RNA interference）抑制胃癌细胞株BGC-823中DNA甲基转移酶1（DNA methylation transferase 1,DNMT1）基因的表达，当DNMT1基因沉默后观察p16基因的表达情况。 方法:以DNMT1的mRNA核苷酸序列，构建siRNA质粒1、2、3和阴性对照siRNA质粒b，胃癌细胞培养后经脂质体转染。对DNMT1基因行Q-PCR检测其mRNA表达水平及Western blot检测其蛋白表达水平，确认其表达下调后筛选出最佳干扰质粒。以同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组、阴性对照组和空白对照组的p16基因的表达情况，以确认抑制DNMT1基因表达后对胃癌细胞p16基因的影响。结果:RNAi可有效抑制胃癌细胞株BGC-823中DNMT1基因的表达。对转染后的胃癌细胞DNMT1基因检测mRNA及蛋白表达情况，结果显示，转染siRNA2的胃癌细胞中DNMT1的表达明显低于其他转染组、阴性对照组及空白对照组（P＜0.05），由此筛选出最佳干扰质粒siRNA2。用同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组（siRNA2）、阴性对照组和空白对照组的p16基因表达情况。结果显示，最佳干扰组的mRNA（1.6727±0.2242）及蛋白（0.9227±0.0337）表达水平均高于阴性对照组（1.0025±0.0877）、（0.5440±0.0229）和空白对照组（0.4729±0.0940）、（0.4767±0.0774）（P＜0.05）。结论:用RNAi可以抑制胃癌细胞DNMT1基因的表达从而使p16基因去甲基化，使p16基因恢复表达。
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| 关 键 词： | 胃癌 DNA甲基转移酶 干扰 甲基化 |
| 收稿时间： | 2017-10-27 |
| 修稿时间： | 2018-02-25 |
Effects of inhibiting the expression of DNMT1 on the p16 gene of gastric cancer cells |
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| ZHAO Jun,ZHU Lei,ZHAO Guohai. Effects of inhibiting the expression of DNMT1 on the p16 gene of gastric cancer cells[J]. Acta Metallurgica Sinica, 2018, 23(4): 395-399. DOI: 10.12092/j.issn.1009-2501.2018.04.006 |
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| Authors: | ZHAO Jun ZHU Lei ZHAO Guohai |
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| Affiliation: | Department of Gastrointestinal Srugery,Yijishan Hospital of Wannan Medical College, Wuhu 241000, Anhui, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gastric cancer DNA methylation transferase RNA interference methylation |
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