CTGF-siRNA对TGF-β1诱导的肝星状细胞胶原分泌的影响 |
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引用本文: | 张羽飞,;李厚忠,;高晓虹,;袁晓环,;初彦辉.CTGF-siRNA对TGF-β1诱导的肝星状细胞胶原分泌的影响[J].中国食物与营养,2014(8):64-67. |
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作者姓名: | 张羽飞 ;李厚忠 ;高晓虹 ;袁晓环 ;初彦辉 |
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作者单位: | [1]牡丹江医学院黑龙江省抗纤维化生物治疗重点实验室,黑龙江牡丹江157011; [2]牡丹江医学院医药研究中心,黑龙江牡丹江157011; [3]牡丹江医学院药学院药理教研室,黑龙江牡丹江157011; [4]牡丹江医学院生物技术实验室,黑龙江牡丹江157011 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(项目编号:81070329);黑龙江省卫生厅科研项目(项目编号:20071001);牡丹江医学院科学技术研究项目(项目编号:B200821). |
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摘 要: | 目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的小RNA(CTGF-siRNA)对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)胶原分泌的影响。方法:实验分为5组:正常组(单纯HSC-T6细胞组)、对照组(TGF-β1诱导组)、siRNA组、非特异siRNA组、lipo组(脂质体组)。培养大鼠HSC-T6细胞,以10ng/mL终浓度的TGF-β1对培养的HSC-T6细胞进行诱导,再通过脂质体法将CTGF-siRNA转染入HSC-T6细胞,通过RT-PCR、Western blotting方法研究各实验组细胞中CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen type I,Col 1a1)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA及蛋白的表达水平。结果:正常组细胞内CTGF有低水平的表达,在给予TGF-β1诱导后表达水平显著升高(P0.05);TGF-β1刺激24h后,靶向转染入特异性siRNA后,CTGF、Col 1a1、FN及α-SMA的表达均显著下调(P0.05)。结论:本研究提示,通过RNA干扰使CTGF基因沉默后,在体外可明显抑制HSC-T6肝成纤维细胞的表型转化及细胞外基质的合成,进一步提示CTGF是促肝纤维化的关键性细胞因子,而RNA干扰是一种特异高效的很有前途的干预手段,为基因治疗肝纤维化提供实验依据。
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关 键 词: | 肝星状细胞 TGF-β 结缔组织生长因子 siRNA 肝纤维化 |
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