花生致敏蛋白Ara h 3单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 |
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引用本文: | 孙富宇,席俊,范雨函,水天娇,杨欢欢,尚阿晨.花生致敏蛋白Ara h 3单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定[J].粮食与油脂,2023(9):79-83. |
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作者姓名: | 孙富宇 席俊 范雨函 水天娇 杨欢欢 尚阿晨 |
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作者单位: | 河南工业大学粮油食品学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金面上项目(32172310); |
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摘 要: | 以Ara h 3为免疫原免疫小鼠。选取血清效价高的小鼠再次免疫,制备出脾细胞后与骨髓瘤细胞一起进行细胞融合,得到杂交瘤细胞株,筛选阳性株制备大量单克隆抗体。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)对制备的单克隆抗体进行效价测定、敏感性测定和特异性测定。通过蛋白质免疫印迹试验进一步验证其特异性。结果表明:免疫性较好的4B2单克隆抗体经纯化后的效价为1∶5.12×105。由敏感性测定得知4B2单克隆抗体的半抑制浓度(IC50)为389 ng/mL,证明其具有较好的敏感性,交叉反应率小于0.5%,成功制备出纯度高、效价高、敏感性好、特异性强的Ara h 3鼠源单克隆抗体,为建立免疫学快速检测方法奠定了基础。
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关 键 词: | Ara h 3 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 |
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