转氨酶的固定化及酶学性质研究 |
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引用本文: | 董正伟,朱芳莹,朱文渊,田宋奎,柳志强.转氨酶的固定化及酶学性质研究[J].发酵科技通讯,2016(2):81-87. |
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作者姓名: | 董正伟 朱芳莹 朱文渊 田宋奎 柳志强 |
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作者单位: | 浙江工业大学生物工程学院浙江省生物有机合成技术研究重点实验室,浙江杭州310014;生物转化与生物净化教育部工程研究中心,浙江杭州310014 |
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摘 要: | 利用环氧树脂载体进行固定化转氨酶的研究,通过单因素优化确定了较优的酶固定化条件:ES-103b树脂载体、转氨酶和辅酶磷酸吡哆醛最佳质量比为50:6:5,在pH为7.0的1mol/L磷酸钾缓冲液介质中吸附25 h.将得到的固定化颗粒重新置于pH为9.0的100 mmol/L磷酸钾缓冲液中,30℃保温30 h.取出后置于pH为8.5的3 mol/L甘氨酸-NaOH缓冲液中,25 ℃保温12h,制得固定化转氨酶,其比活力为52.7 U/g(湿载体),酶活回收率达到49.3%.酶学性质研究表明:固定化转氨酶催化反应最适pH、温度分别为7.0、50℃;固定化酶热稳定性及pH稳定性明显提高,50℃条件下的半衰期为20.2 d;在pH 8.0的三乙醇胺缓冲液中(4℃),10 d后酶活仍保持初始酶活的82.3%.
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关 键 词: | 转氨酶 固定化 磷酸吡哆醛 比酶活 酶学性质 |
Immobilization of transaminase and characterization of its enzymatic properties |
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Abstract: | |
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